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    植物細胞實(shí)驗室如何施工建設
    作者:admin 時(shí)間:2020-08-21 14:28:19 瀏覽:203

              植物細胞實(shí)驗室是給植物細胞生長(cháng)環(huán)境、細胞保存環(huán)境,又保障室內無(wú)菌環(huán)境的實(shí)驗室,主要用于農業(yè)和生物、醫藥等行業(yè),研究例如如何讓農作物增產(chǎn)等實(shí)驗,所以需要對他的環(huán)境保障措施嚴格要求,而實(shí)驗室的施工建設對于環(huán)境保障有著(zhù)重要的作用,我們該如何去施工建設呢?


       一、培養室

    植物細胞實(shí)驗室如何施工建設

      在培養室是施工建設的重點(diǎn),不僅需要對施工材料有要求,還會(huì )對以下常用的基本設備有一定的要求。


      1.儀器:


     ?。?)顯微鏡:倒置顯微鏡——是組織細胞培養室所必需的日常工作常規使用設備之一,便于掌握細胞的生長(cháng)情況并觀(guān)察有無(wú)污染等。


     ?。?)培養箱:體外培養的細胞和體內細胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,大多數情況下,最適溫度是37℃,溫差變化一般不應超過(guò)±0.5℃,細胞在溫度升高2℃時(shí),持續數小時(shí)即不能耐受,40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的培養箱,如具有較高靈敏度的恒溫培養箱及CO2培養箱。


     ?。?)干燥箱:用于細胞培養箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí),電熱干燥箱升溫較高,一般需達到160℃以上。通常使用鼓風(fēng)式電熱干燥箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好,缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始,至100℃時(shí),停止鼓風(fēng),應避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長(cháng)。消毒后,不能立即打開(kāi)箱門(mén)以免驟冷而導致玻璃器皿損壞,應等候溫度自然下降至100℃以下方可開(kāi)門(mén)。


     ?。?)水純化裝置:細胞培養對水的質(zhì)量要求較高,細胞培養以及與細胞培養工作相關(guān)的液體的配制用水必須事先嚴格純化處理。水純化時(shí)可采用離子交換裝置或蒸餾器。離子交換純水尚不能有效去除有機物,因此用水時(shí)尚需再次蒸餾。進(jìn)行細胞培養時(shí)配制各種培養液及試劑等均需使用三次蒸餾水:即使是用于玻璃器皿的沖洗,也應使用二次以上蒸餾水。


     ?。?)冰箱:細胞培養室必須配備。


      a.普通冰箱或冷藏柜


      ——儲存培養液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養用的物品及短期保存組織標本。


      b.低溫冰箱(-20℃)、超低溫冰箱?


      ——用于儲存需要冷凍保存生物活性及較長(cháng)時(shí)期存放的制劑,如酶、血清等。


      ——細胞培養室的冰箱應屬專(zhuān)用,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質(zhì),且應保持清潔。


     ?。?)細胞冷凍儲存器:儲存器常用的是液氮容器。根據使用需要分為不同的類(lèi)型及多種規格。選擇購置液氮容器時(shí)要綜合考慮容積大小,取放使用方便及液氮揮發(fā)量(經(jīng)濟)三種因素。液氮容器的大小可自25L~500L,可以?xún)Υ?ml的安瓿250~15000個(gè)左右。液氮溫度可低達-196℃,使用時(shí)應防止凍傷。由于液氮不斷揮發(fā),應注意觀(guān)察存留液氮情況,及時(shí)定期補充液氮,避免揮發(fā)過(guò)多而致細胞受損。


     ?。?)離心機:進(jìn)行細胞培養時(shí),常規需要進(jìn)行制備細胞懸液、調整細胞密度、洗滌、收集細胞等工作,通常需要使用離心機。


      a.一般可常規配置4000rpm的國產(chǎn)臺式離心機,例如細胞沉降,使用80~100g的離心機即可,離心力過(guò)大有時(shí)可能引起細胞的損傷。


      b.另外,可根據需要添置其他類(lèi)型如大容量或可調節溫度的離心機等。


      c.若需特殊用途,例如某些細胞的分離制備需梯度離心,則需另行配置實(shí)驗所需的具備其他特殊功能的離心機。


     ?。?)天平:常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。


      分析天平的感量為0.1mg、0.01mg和0.001mg。根據稱(chēng)取物質(zhì)的量和稱(chēng)量精度的要求,選擇適宜級別的天平。要求精密稱(chēng)定時(shí),當取樣量大于100mg選用感量為0.1mg天平,在100-10mg選用感量為0.01mg天平,小于10mg選用感量為0.001mg天平。


     ?。?)消毒器:直接或間接與細胞接觸的物品均需消毒滅菌處理。


     ?。?0)濾器:目前細胞培養工作中采用的培養用液,包括人工合成培養液、血清、消化用胰酶等常含有維生素、蛋白、多肽、生長(cháng)因子等物質(zhì),這些物質(zhì)在高溫或射線(xiàn)照射下易發(fā)生變性或失去功能,因而上述液體多采用濾過(guò)消毒以除去細菌。


      2.培養用器皿:


     ?。?)培養器皿:供細胞接種、生長(cháng)等用的器皿,可由透明度好、無(wú)毒的中性硬質(zhì)玻璃或無(wú)毒而透明光滑的特制塑料制成。


     ?。╝)玻璃培養器皿的優(yōu)點(diǎn)是多數細胞均可生長(cháng),易于清洗、消毒,可反復使用,并且透明而便于觀(guān)察;缺點(diǎn)是易碎,清洗時(shí)費人力。


     ?。╞)塑料制培養器皿的優(yōu)點(diǎn)是一次性使用,廠(chǎng)家已消毒滅菌密封包裝,打開(kāi)即可用于細胞培養操作。


      3.常用的培養器皿:


      培養瓶:由玻璃或塑料制成。主要用于培養、繁殖細胞。進(jìn)行培養時(shí)培養瓶瓶口加蓋螺旋瓶蓋或膠塞,膠塞多用于密封培養。國產(chǎn)培養瓶的規格以容量(ml)表示,如250ml、100ml、25ml等;進(jìn)口培養瓶則多以底面積(cm2)表示。


      培養皿:由玻璃或塑料制成,供盛取、分離、處理組織或做細胞毒性、集落形成、單細胞分離、同位素摻入、細胞繁殖等實(shí)驗使用。常用的培養皿規格有10cm、9cm、6cm、3.5cm等。


      多孔培養板:為塑料制品??晒┘毎寺〖凹毎拘缘雀鞣N檢測實(shí)驗使用。其優(yōu)點(diǎn)是節約樣本及試劑,可同時(shí)測試大量樣本,易于進(jìn)行無(wú)菌操作。培養板分為各種規格,常用的規格有:96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。


      各種單層生長(cháng)的細胞在培養器皿中長(cháng)滿(mǎn)時(shí)可獲得的細胞數,主要是取決于器皿的底表面積和細胞體積的大小。常用培養器皿及可獲得的細胞數(以Hela細胞為例)。


     ?。?)培養操作有關(guān)的器皿:


      a.貯液瓶:主要用于存放或配制各種培養用液體如培養液、血清及試劑等。貯液瓶分為各種不同規格,如1000ml、500ml、250ml、100ml、50ml、5ml等。


      b.吸管:主要分為刻度吸管、無(wú)刻度吸管??潭任苤饕糜谖?、轉移液體,常用的有1ml、2ml、5ml、10ml等規格。無(wú)刻度吸管分為直頭吸管及彎頭吸管,除可以作吸取、轉移液體外,彎頭尖吸管還常用于吹打、混勻及傳代細胞。


      c.加樣器(移液器):用于吸取、移動(dòng)液體或滴加樣本??筛鶕枰{節量的大小,吸量準確、方便。尤以微量加樣器,可保證實(shí)驗樣品(或試劑)含量精確,重復性良好。目前,可高溫消毒的,多通道的各類(lèi)移液器可供使用者選擇,能確保加樣準確、快速、方便并且達到無(wú)菌要求。


     ?。?)其他用品:尚有收集細胞用的離心管,放置試劑或臨時(shí)插置吸管用的試管,裝放吸管以便消毒的玻璃或不銹鋼容器,用于存放小件培養物品便于高壓消毒的鋁制飯盒或貯槽,套于吸管頂部的橡膠吸頭,封閉各種瓶、管的膠塞、蓋子、凍存細胞用的安瓿或凍存管、不同規格的注射器、燒杯和量筒以及漏斗,超凈工作臺使用的酒精燈,供實(shí)驗人員操作前清潔消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型噴壺等。


      4.器械:


      主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時(shí)持取物件。


     ?。?)常用的有:手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪(彎剪及直剪),用于解剖動(dòng)物、分離及切剪組織,制備原代培養的材料;眼科虹膜小剪(彎剪或直剪),用于將組織材料剪成小塊;血管鉗及組織鑷、眼科鑷(彎、直),用于持取無(wú)菌物品(如小蓋玻片)夾持組織等;口腔科探針或代用品,用以放置原代培養之組織小塊。


     ?。?)特殊設備:細胞培養實(shí)驗室除了應配備上述的常用基本設備以外,如有條件,可添置一些特殊或先進(jìn)的設備儀器,以便更有效、更精確、更深入地進(jìn)行實(shí)驗室工作。


      二、洗滌間


      根據工作量的大小決定其大小。在實(shí)驗室的一側設置專(zhuān)用的洗滌水槽,用來(lái)清洗玻璃器皿。中央實(shí)驗臺還應配置水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以購置一臺洗瓶機。準備洗液缸,專(zhuān)門(mén)用于洗滌對潔凈度要求很高的玻璃器皿。此外還應配置落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等。地面應耐濕并排水良好。


      三、培養基配制間


      配備的主要儀器設備有:冰箱、天平、微波爐、pH計、培養基分裝器、藥品柜、器械柜、抽氣泵、電爐、各種規格的培養瓶、培養皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶、儲藏瓶等。


      四、消毒間


      配備實(shí)驗臺、高壓滅菌鍋、排風(fēng)滅火設備、細菌過(guò)濾設備、干熱消毒柜、電爐等。滅菌鍋的選擇應根據不同的要求選擇不同型號的滅菌鍋。一般實(shí)驗室可選用小型的醫用手提式高壓滅菌鍋,較大的實(shí)驗室可選用立式自動(dòng)控制壓力和溫度的滅菌鍋。生產(chǎn)性的實(shí)驗室可選用大型的臥式滅菌鍋。如果沒(méi)有條件的話(huà),可以將上述工作間合并成一個(gè)準備間,要求是設備的安裝和排列要合理、房間要寬敞、明亮、透風(fēng),地面要便于清潔、防滑。


    植物細胞實(shí)驗室如何施工建設

      五、無(wú)菌操作室


      無(wú)菌操作室主要用于實(shí)驗材料的接種操作,所以又叫接種室。通常由里外兩間組成,外間是緩沖間,用于準備工作,還有防止污染的作用。緩沖間的門(mén)應該與接種室的門(mén)錯開(kāi),兩個(gè)門(mén)也不要同時(shí)開(kāi)啟,以保證無(wú)菌室不因開(kāi)門(mén)和人的進(jìn)出帶進(jìn)雜菌。緩沖間內應該設有水槽、實(shí)驗臺、鞋帽架、和柜子、紫外燈。無(wú)菌操作室的內壁應當用塑鋼板或瓷磚裝修,工作人員進(jìn)入操作間前要穿上消過(guò)毒的工作服和拖鞋。室內應配有超凈工作臺,紫外燈、解剖鏡、各種接種器械等。


          今年全球各地都遭到蝗災的襲擊,有引發(fā)糧食危機的趨勢,國家也開(kāi)始提倡節約糧食的大勢下,我們有研發(fā)糧食農作物增產(chǎn)的需求,而植物細胞實(shí)驗室正好能滿(mǎn)足需求,這決定著(zhù)在之后的一段時(shí)間植物細胞實(shí)驗室將處于重要地位。上海有盛凈化公司匯聚了多位高級技術(shù)人才,形成了工作經(jīng)驗豐富的工作團隊,專(zhuān)注于實(shí)驗室的施工品質(zhì)保障,為實(shí)驗室環(huán)境的無(wú)菌培養環(huán)境保駕護航。


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